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梯度基因擴增儀(HN-SP96G)工作原理

更新時(shí)間:2024-05-20瀏覽:276次

梯度基因擴增儀(HN-SP96G)擴增儀的工作原理:

梯度基因擴增儀(HN-SP96G)的工作原理主要基于聚合酶鏈式反應(PCR)技術(shù),通過(guò)循環(huán)變性-退火-延伸三個(gè)基本步驟,實(shí)現DNA片段的體外擴增。具體過(guò)程如下:


  1. 變性:DNA雙鏈在93℃左右的高溫下解離成單鏈,以便與引物結合。

  2. 退火:溫度降至55℃左右時(shí),引物與DNA單鏈的互補序列配對結合。

  3. 延伸:在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈。

通過(guò)不斷循環(huán)這三個(gè)步驟(通常每完成一輪循環(huán)需2~4分鐘),可以獲得大量的DNA擴增產(chǎn)物。理論上,經(jīng)過(guò)25~30輪循環(huán)后,基因可擴增10^9倍以上,實(shí)際上一般可達10^6~10^7倍。


基因測序儀的工作原理:

測序儀的工作原理主要基于特定的測序技術(shù),如Sanger雙脫氧鏈末端終止法。以下是其工作原理的簡(jiǎn)要概述:

  1. DNA片段制備:首先,需要將要測序的DNA片段進(jìn)行特定的處理和準備。

  2. 測序反應:在測序反應中,利用特定的測序引物和DNA聚合酶,同時(shí)加入四種脫氧核苷酸(dATP、dTTP、dCTP、dGTP)和一種雙脫氧核苷酸(ddNTP)。雙脫氧核苷酸在合成中會(huì )隨機終止DNA鏈的延伸,形成不同長(cháng)度的DNA片段。

  3. 電泳分離:通過(guò)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳對這些不同長(cháng)度的DNA片段進(jìn)行分離。

  4. 檢測和讀數:最后,通過(guò)特定的檢測設備(如激光掃描儀)檢測分離后的DNA片段,并根據片段的長(cháng)度和順序,讀出DNA的序列。


需要注意的是,隨著(zhù)技術(shù)的進(jìn)步,目前已經(jīng)有更高效的測序技術(shù),如高通量測序技術(shù)(也稱(chēng)為下一代測序技術(shù)),其工作原理可能有所不同,但基本原理仍然是通過(guò)檢測DNA片段的序列來(lái)確定整個(gè)DNA分子的序列。

總的來(lái)說(shuō),擴增儀和測序儀都是生物實(shí)驗室中重要的工具,它們在分子生物學(xué)、醫學(xué)診斷、法醫學(xué)鑒定、農業(yè)生物技術(shù)等領(lǐng)域有著(zhù)廣泛的應用。

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